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药食用菌新种类维护及DUS测验攻略研发现状与展望

  药食用菌是具有多种生物学功用的重要生物类群。近年来,我国越来越重视药食用菌的研讨和运用,药食用菌工业快速展开,新种类维护以及种类权等问题成为影响工业展开的要害要素。介绍了我国农业乡村部发布的测验攻略的规模、发布时刻、首要内容、提交资料要求和测验性状等进行了解读和剖析,概述了药食用菌测验攻略研发及测验络绎不绝研讨现状,论说了药食用菌新种类的展开进程及请求授权状况,对药食用菌新种类维护和

  新种类维护是新种类种质资源、培养、加工等一系列工业化进程的重要根底[1]。特异性(distinctness)、共同性(uniformity)和安稳性(stability),简称DUS,是新种类点评的要害目标[2]。特异性是指1个种类有1个以上性状显着差异于已知种类;共同性是指1个种类的特性除可预期的天然变异外,集体内个别间相关的特征或特性体现共同;安稳性是指1个种类经过重复繁衍后或在特定繁衍周期结束时,其首要性状坚持不变[3]。新种类测验简称DUS测验,是指根据相关测验络绎不绝规范,经过田间培养或室内剖析实验,对种类进行特异性、共同性和安稳性点评的进程,是新修订的《种子法》中确认的种类办理的根本络绎不绝根据[4],是我国实施新种类维护准则的中心络绎不绝要件[5]。跟着新种类维护作业的前进与展开,新种类DUS测验作业的规范化与规范化变得越来越重要。

  我国1999年4月23日正式参加世界植物新种类维护联盟(International Unionfor the Protection of New Varieties of Plants,UPOV)成为UPOV第39位成员国,当日即开端受理国内、外植物新种类权的请求[6]。2021年4月23日是我国参加UPOV的第22个周年纪念日。22年来,我国植物新种类维护作业从无到有,各级农业部门与其作业单位创造性地展开作业,使植物新种类维护作业取得了长足展开,出现出繁荣向上展开的可喜局面。跟着种类维护专门安排逐步完善,农业部于2013年12月27日发布的《首要农作物种类审定办法》规则审定种类有必要具有DUS[7]。2000年农业部植物新种类测验中心树立,并在全国10大生态区树立第一批14个测验分中心,每年承当测验使命总量都在3000件以上,有用支撑了种类权的授权作业。现在,已在全国树立1个DUS测验总中心、27个分中心和6个专业测验站[8];发布了200多种农作物新种类DUS测验攻略和18种农作物新种类DNA指纹图谱断定络绎不绝规范,拟定了13个药食用菌DUS测验攻略,建成了包括16 000多个种类的表型、图画和DNA指纹图谱的种类数据库[9],为种类维护及种类办理供给强有力的络绎不绝支撑与确保[10]。

  药食用菌多为菌物中构成大型子实体的一类真菌,以担子菌为主,少量为子囊菌[11]。我国现有食用菌936种[12]、药用菌473种[13],药食两用250余种[14]。跟着人们对药食用菌健康保健功用了解和关于药食用菌中有用成分研讨的深化,药食用菌作为一种健康食物日益遭到人们的重视[15]。本文对农业部科技展开中心药食用菌类DUS测验攻略进行总述和剖析,为我国研发药食用菌DUS测验攻略相关络绎不绝规范供给光亮,以促进药食用菌新种类维护和工业展开。

  现在我国没有专门针对药食用菌新种类维护的准则,药食用菌新种类归入植物新种类维护办理之中,其维护展开进程见图1。植物新种类是世界贸易安排供认的知识产权办法之一,吉星高照世界知识产权维护条约维护规模[16]。1961年12月根据《维护植物新种类世界条约》在巴黎的默不做声,UPOV正式树立,UPOV树立至今有74个成员国[17]。经过各个国家对UPOV条约的实践,以及生物络绎不绝的前进,一起为了加大对种类权的维护,于1972、1978、1991年对其进行了修正,相较于UPOV条约1978年文本,1991年文本更大程度维护育种者权益[18]。1997年3月20日国务院正式发布《植物新种类维护法令》,标志着我国在植物新种类培养范畴的知识产权维护准则正式树立[19]。多年来,与世界通行的植物种类维护准则彻底不同,我国的首要作物种类实施的是审定和确定准则[20]。前者重视点评的是种类的经济性状,后者重视断定的是知识产权归属。1997年《新种类维护法令》发布实施以来,有用调集了育种者的积极性,促进了优秀种类的立异和推广使用[21]。

  跟着植物新种类维护作业的推进,到2019年12月底,农业乡村部共受理植物新种类请求33 803件,颁发种类权13 959件[22]。从2017年至今,我国植物新种类权请求量接连位居世界第1位,已成为知识产权维护大国[23]。就已发布的11批农业植物种类维护名录,受维护的植物种类达191个属(种),其间药食用线个种属,占总的农业维护种类的5%[24],已获批的种类有白灵侧耳中农1号,羊肚菌的川羊肚菌1号、川羊肚菌3号、川羊肚菌4号、川羊肚菌5号、川羊肚菌6号,香菇的HOKSY8号菌、沪香F2、沪香F3、申香215,黑木耳的黑尊3号、黑尊4号、黑尊5号以及灵芝的仙芝2号、禅芝、峨芝(表1)。余下几个种属根本是在2018年开端进行新种类维护请求,农业乡村部未见有种类权授权公告。药食用菌种类维护开端的较其他物种晚,白灵侧耳于2005年作为第1个药食用菌被归入植物新种类第6批维护名录,仅占第1~6批受维护种类种属总量的1.6%;往后10年第10批种类维护名录发布,添加了5个药食用菌种属,占比添加至4.3%;2019年第11批添加了9个种属,占比添加至7.8%。一起UPOV数据计算显现,到2021年6月12日,UPOV拟定并发布了335个属和种的植物新种类DUS测验攻略以及菌类新种类DUS测验攻略3个,为双孢蘑菇、香菇[25]、平菇,占比不到1%[26]。归纳农业乡村部和UPOV数据来看,尽管药食用菌的维护种属数量整体上呈递加趋势,但总观一切受维护植物新种类,受维护药食用菌数量少,种类少;从2005—2016年、2016—2019年的数据空白显现药食用菌受维护种类增加连续且缓慢。

  测验攻略既是断定测验种类是否吉星高照新种类,供给植物新种类维护断定的牢靠根据,也是辅导测验安排展开DUS测验作业的络绎不绝手册[27]。农业乡村科技展开中心现已发布209个植物属或种的DUS测验攻略,菌类15种。由图2可看出花卉所占份额最大,占悉数DUS测验攻略的29%;其次是果树和蔬菜,别离占20%、17%;然后是大田作物(15%)、药用植物(8%)和牧草(5%);菌类占比(6%)仅高于牧草。比较于其他植物新种类维护,药食用菌维护力度较低,维护进展较慢[28]。

  测验攻略是辅导DUS测验展开作业的行动攻略。我国DUS测验首要有官方测验、现场调查和育种人自主或托付测验等办法[29]。现在我国大部分DUS测验攻略是在光亮UPOV攻略的根底上拟定的[30]。农业部科技展开中心发布的药食用菌DUS测验攻略由10个部分组成,即规模,规范性引证文件,术语和界说,符号,繁衍资料的要求,测验办法,特异性、共同性和安稳性成果的断定,性状表,分组性状和络绎不绝问卷。其间,繁衍资料的要求,测验办法,特异性、共同性和安稳性成果的断定以及性状表是测验攻略拟定中尤为重要的部分。

  繁衍资料的要求是对提交的待测种类繁衍资料的办法、数量、规范、保存条件等作出规则。在农业乡村部发布的现行13种菌类DUS测验攻略中,繁衍资料首要以菌种或母种2种办法供给,提交的母种或菌种数量至少为3支。繁衍资料的具体要求为均运用规范(180~200 mm)×(18~20 mm)的母种试管;斑驳陆离马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养保存;要求供给外观规整,菌落边际规整,菌丝生机强的母种平板。除羊肚菌属和金针菇确保送抵时菌龄为7~10 d外,其他均为10~14 d(表2)。DUS测验攻略也要求当测验单位收到菌种后,应立即扩繁留存菌种,并妥善保存,已备复查,如有特别保藏要求,应供给保藏的具体阐明。提交的资料应契合我国植物检疫的有关规则,除非批阅机关答应或要求进行处理,提交的繁衍资料一般不进行任何影响种类性状正常表达的处理,假如已处理,应供给处理的具体阐明。

  测验办法是对测验周期、测验地址、田间实验、性状调查、附加测验等进行具体要求。已发布的13个药食用菌DUS测验攻略的指定的测验办法见表3。药食用菌的测验周期至少为2个独立的家畜周期,即从发菌到第1潮子实体菌盖彻底翻开、展平。通常在1个地址进行测验,假如某些性状在该地址不能充沛表达,可在其他契合条件的地址对其进行观测。田间实验的每小区培养数根据种类不同而不同,但都进行2个重复,在此之前,田间测验实验规划的要素是要在能确保菌种正常家畜、性状正常表达以及有利于观测的条件下进行。最终,在进行个别观测性状时可对菌丝体、子实体或培养种取样;进行集体观测性状时有必要选取整个小区或规则巨细的混合样本进行观测;而在观测个别或某部位时,每个个别只需取1个样本进行观测。

  特异性、共同性和安稳性成果的断定是对整体准则以及3种特性的断定根据和办法进行界说(表4)。当请求种类至少在1个性状上与近似种类具有显着且可重现的差异时,即可断定请求种类具有特异性。假如1个种类具有共同性,则能够为该种类具有安稳性,一般不对安稳性进行测验;必要时,能够运用继代培养物进行培养,与曾经供给的繁衍资料比较,若性状表达无显着变化,则可断定该种类具有安稳性。测验种类共同性断守时,斑驳陆离不同的集体规范和至少95%的承受概率,以及样本巨细不一起,最多可答应的不同数量异型株表明。

  性状表是对性状表的内容进行具体阐明、举例和注释,性状表具体列出了性状称号、表达类型、表达状况及相应的代码和规范种类、观测时期和办法等内容,见表5。据计算可知,每个种类测验攻略拟守时性状选取的数量在18~32个,性状表达也不共同,除白灵侧耳的质量性状表达数量为0以外,其他性状表达数量均在1个以上;测验进程中至少选取4个时期、2种以上单种或2种测验办法联用的办法进行性状调查;进行测验的规范种类不低于3种。

  药食用菌请求量以及授权种类量虽呈大幅增加的趋势,但就现在仅发布的13个DUS测验攻略数和授权种类数目在整体受维护种类数目仅占6%,药食用菌新种类请求及授权首要会集在白灵侧耳、羊肚菌属、香菇、黑木耳和灵芝5个种属,其他已有DUS测验攻略的药食用菌,如双孢蘑菇、金针菇和蛹虫草等8个种属虽已有新种类的请求但均未见获批,药食用菌新种类请求及授权出现散布不均匀、新种类权维护的力度远小于其他种类的现象。石沉大海安排展开药食用菌新种类DUS测验攻略的拟定,完善药食用菌新种类维护准则,调集育种者请求药食用菌新种类维护的积极性。

  药食用菌DUS测验测验性状多,作业量较大,测验性状大都为数量性状,受温度、时刻等要素的影响较大,现在观测络绎不绝较为传统。石沉大海提升药食用菌DUS测验络绎不绝,合理使用分子生物学前沿络绎不绝推进药食用菌优秀新种类转化,如经过分子标记络绎不绝[31]和多基因相关剖析[32]挑选和断定药食用菌优秀种类。经过测验新络绎不绝、新办法的研讨,安稳药食用菌DUS测验络绎不绝目标和参数,进步药食用菌新种类点评的科学性。

  我国现有的27个测验分中心其首要功用是研讨相关植物的测验络绎不绝与规范、承当DUS测验络绎不绝断定作业和络绎不绝咨询服务[33]。现有DUS测验分中心大多为归纳性测验安排或以粮食作物为要点的测验中心。到现在,只要上海和公主岭2个测验分中心承当部分食用菌DUS测验,未有1个测验分中心是专用于药食用菌DUS测验。因为药食用菌在种质培养、培养出产进程中与植物作物存在明显差异,石沉大海树立药食用菌专用DUS测验中心,愈加专业化地展开药食用菌新种类测验服务。

  伴跟着知识经济成为年代潮流,新种类立异成为世界环境下我国种业的中心竞争力之一。药食用菌新种类权对外请求数量少、知识产权维护认识缺乏等问题杰出[28],在药食用菌范畴,现在我国短少走出国门、走向世界的认识。为提升药食用菌新种类立异,石沉大海加强世界对接;学习世界新种类培养与测验先进络绎不绝,在已被UPOV斑驳陆离的茶、山茶、牡丹和丁香的世界攻略根底上编制出药食用菌世界攻略[34],强化DUS测验信息化形式,与各成员国交流同享种类名检查体系,DUS实验规划与数据剖析软件及设备[35],与“一带一路”沿线国家树立继续有用的协作,促进药食用菌新种类维护世界化展开。

  来 源:刘晓柳,钟 灿,谢 景,侯凤飞,戴甲木,张水寒,金 剑.药食用菌新种类维护及DUS测验攻略研发现状与展望 [J]. 中草药, 2022, 53(4):1173 -1180 .回来搜狐,检查更多